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    賽鴿飛行能力鑒定試劑

    2025-07-03·196 瀏覽

    賽鴿飛行能力鑒定試劑

    賽鴿飛行能力鑒定試劑(PCR-熒光探針法)使用說明書

    【賽鴿飛行能力鑒定試劑產(chǎn)品名稱】

    通用名稱:賽鴿飛行能力鑒定試劑(PCR-熒光探針法)

    【賽鴿飛行能力鑒定試劑預期用途】

    本試劑盒用于鴿子飛行能力基因定性檢測,可對鴿子的飛行能力進行預測。

    【賽鴿飛行能力鑒定試劑檢測原理】

    根據(jù)鴿子飛行能力基因設(shè)計特異性引物和探針,利用熒光定量PCR技術(shù),通過檢測熒光的釋放和強度,來檢測飛行能力基因。

    【賽鴿飛行能力鑒定試劑試劑盒組成】

    本產(chǎn)品由特異性引物探針、Taq酶以及反應緩沖液組成。

    【賽鴿飛行能力鑒定試劑主要組成成分】

    序號組分標示裝量/管數(shù)量(管)
    110xqPCR Buffer400ul1
    2dNTP(2.5mM)240ul1
    3Hot Star Taq (5u/ul)30ul1
    4LDHA引物探針200ul1
    5DRD4a引物探針200ul1
    6DRD4b引物探針200ul1

    【賽鴿飛行能力鑒定試劑儲存條件及有效期】

    -20℃避光保存有效期為12個月;切忌反復凍融。


    【賽鴿飛行能力鑒定試劑樣本要求】


    1、羽毛:采集胸部或腹部或腿部羽毛2根,切忌使用自然脫落的羽毛。

    2、全血:使用EDTA作為抗凝劑,切忌使用肝素抗凝。要求使用新鮮全血,或在2~8℃保存不超過7天,或在-20℃以下保存不超過一個月,應盡量避免反復凍融。

    【賽鴿飛行能力鑒定試劑檢驗方法】

    1、樣本處理與核酸提取,具體操作參照相關(guān)操作說明書。

    (1)0.2mlPCR管中,加入羽毛2-4根,加入Reagent A 20ul(注意淹沒樣本),99℃加熱20分鐘;

    (2)向上一步的Pcr管中加入Reagent B 100ul,5000rpm離心30秒-1分鐘,備用;

    2、儀器準備將每臺儀器接通電源,檢查是否運轉(zhuǎn)正常。

    3、物品準備:離心機、冰盒、移液器、吸頭;試劑準備(未分裝規(guī)格使用):將PCR反應液解凍、混勻,瞬時離心后分裝14μL/管。

    序號組分用量反應液
    110xqPCR Buffer2ul14ul反應液
    2dNTP(2.5mM)1.6ul
    3Hot Star Taq (5u/ul)0.2ul
    4去離子水10.2ul


    管號1管號2管號3
    14ul反應液14ul反應液14ul反應液
    4ul LDHA引物探針4ul DRD4a引物探針4ul DRD4b引物探針
    2ul DNA模板2ul DNA模板2ul DNA模板

    4、PCR擴增條件(反應體系為20μL)

    擴增溫度擴增時間循環(huán)數(shù)
    95℃5min1
    95℃15sec40 cycles
    60℃30sec(采集熒光)FAM及VIC


    5、熒光定量檢測

    結(jié)果判定

    反應液飛行能力基因 基因型
    野生基因型雜合基因型突變基因型
    管號1 LDHA基因GGAGAA
    管號2 DRD4a基因CCCTTT
    管號3 DRD4b基因CCCTTT
    FAM VIC信號判斷VIC<33,F(xiàn)AM無ctFAM-VIC絕對值<3FAM<33,VIC無ct
    備注FAM可能有ct,F(xiàn)AM-VIC絕對值>5
    VIC可能有ct,F(xiàn)AM-VIC絕對值>5

    【賽鴿飛行能力鑒定試劑檢驗方法局限性】

    本方法只適用于鴿子飛行能力基因檢測。

    【賽鴿飛行能力鑒定試劑產(chǎn)品性能指標】

    1.特異性:對特異性參考品進行檢測,所有參考品檢測結(jié)果陰性。

    2.準確性:對檢測范圍內(nèi)的不同基因型的參考品進行檢測,能檢出相應基因型。

    3.最低檢出限:應不高于5ng/μL。

    4.重復性:檢測范圍內(nèi)的不同基因型的重復性參考品,每個參考品進行10次檢測,結(jié)果能準確分型,且相應檢測結(jié)果Ct值的變異系數(shù)(CV)應≤5.0%。

    5.有效期:試劑盒于-20避光保存,有效期為12個月。

    【賽鴿飛行能力鑒定試劑注意事項】實驗前請仔細閱讀說明書

    1.本試劑盒僅鴿子飛行能力基因體外檢測。有關(guān)實驗室管理規(guī)范嚴格按照行政主管部門頒布的有關(guān)基因擴增檢測實驗室的管理規(guī)定執(zhí)行。

    2.試劑盒應低溫運輸和保存,試劑盒內(nèi)各試劑使用前,請短暫離心。

    3.檢測時,提取樣本必須在生物安全柜中進行,且使用時要注意橫向污染。

    4.實驗應嚴格分區(qū)操作:第一區(qū):試劑制備區(qū)—準備擴增所需試劑;

    第二區(qū):樣本處理區(qū)—待測樣本和對照品處理;

    第三區(qū):PCR擴增區(qū)—PCR擴增檢測。

    本產(chǎn)品為一次性用品,使用后的試劑盒和樣本等廢棄物應作為傳染源按照國家相關(guān)法律法規(guī)處理。

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